Polimerase kettingreaksie, afgekort asPCRin Engels, is 'n molekulêre biologie tegniek wat gebruik word om spesifieke DNS-fragmente te versterk.Dit kan beskou word as 'n spesiale DNS-replikasie buite die liggaam, wat 'n baie klein hoeveelheid DNS grootliks kan verhoog.Gedurende die helePCRreaksieproses, speel een klas stowwe 'n belangrike rol – ensieme.
1. Taq DNA
In eksperimente in die vroeë dae vanPCR, het wetenskaplikes Escherichia coli DNA-polimerase I gebruik, Maar daar is 'n probleem met hierdie ensiem: dit moet nuwe ensiem aanvul elke keer as 'n siklus uitgevoer word, wat die operasiestappe effens ingewikkeld maak en dit is moeilik om ten volle outomaties te versterk.Hierdie probleem is opgelos nadat wetenskaplikes in 1988 per ongeluk Taq DNA-polimerase van Thermus aquaticus geïsoleer het. Sedertdien het die outomatiese amplifikasie van DNA 'n werklikheid geword.Die ontdekking van hierdie ensiem maak ookPCRtegnologie 'n gerieflike, praktiese en universele tegnologie.Tans is Taq DNA-polimerase die mees algemene polimerase in DNA-stelle.
2. PfuDNA
Soos hierbo genoem, het Taq DNase 'n groot fout, so wetenskaplikes het Taq DNA-polimerase tot 'n sekere mate aangepas om nie-spesifieke amplifikasie te vermy as gevolg van wanpassing, wat lei tot onakkurate toetsresultate.Maar die modifikasie van Taq DNA-polimerase kan die aktiwiteit van DNA-polimerase by kamertemperatuur inhibeer.PfuDNA-polimerase kan goed vergoed vir die bogenoemde nadele van Taq DNA-polimerase, sodat die PCR-reaksie normaal uitgevoer kan word, en die sukseskoers van teikengeenamplifikasie effektief verbeter kan word.
3. Omgekeerde transkripsie
Omgekeerde transkriptase is ontdek in 1970. Hierdie ensiem gebruik RNA as 'n sjabloon, dNTP as 'n substraat, volg die beginsel van basisparing, en sintetiseer 'n DNA-enkelstring komplementêr tot die RNA-sjabloon in die 5'-3' rigting.Omgekeerde transkriptase is hoofsaaklik afhanklik van DNA-polimerase-aktiwiteit vanaf DNA- of RNA-sjablone en het dus geen 3'-5'-eksonuklease-aktiwiteit nie.Dit het egter RNase H-aktiwiteit, wat die sintese-lengte van omgekeerde transkriptase tot 'n sekere mate beperk.As gevolg van die lae getrouheid en termostabiliteit van wilde omgekeerde transkriptase, het wetenskaplikes dit ook gewysig.
VirPCReksperimente, die belangrikste verbruiksgoedere is: individuele PCR-buis, 4/8-strook PCR-buis, PCR-plate.
Die van LabioPCR-verbruiksgoederehet die volgendevoordele:
PCR plate: Breë termiese fietsryer-versoenbaarheid;Hoë-kontras, maklike putidentifikasie;goed fluoressensie weerkaatsing;goedhitte-oordrag;Gesertifiseerde DNase, RNase, DNA, PCR-inhibeerders, en pirogeenvry getoets.
Individuele PCR-buise: Verdampingsbestand; goedhitte-oordrag;uitstekende optiese helderheid; Gesertifiseerde DNase, RNase, DNA, PCR-inhibeerders, en pirogeenvry getoets.
4/8-stroke PCR-buise: Ultra-dun mure; hoë helderheid; goeie fluoressensie weerkaatsing;kan in die farmaseutiese industrie, voedselindustrie en molekulêre biologie gebruik word; hoë kwaliteit, maagd PP materiaal; Gesertifiseerde DNase, RNase, DNA, PCR inhibeerders, en pirogeenvry getoets.
Postyd: Jun-09-2023